Flüoresans Situ Hybridisation
Situ hibridizasiyasında flüoresan (FISH), hüceyrələrin DNA'sını axtarmaq üçün istifadə edilən bir neçə üsuldan biridir və xüsusi genlərin və ya genlərin bir hissəsinin olmaması və ya olmamasıdır.
Bir çox müxtəlif növ xərçəng genetik anormallıqla əlaqəli olur. Və genetik olaraq, biz yalnız irsiyyətdən bəhs edirik. Bir ömür boyu hüceyrələr bölmək və böyüdükdə səhv edə bilər.
Bu hüceyrələrdə xərçənglə əlaqəli olan DNT-lərdə mutasiyalar ola bilər.
FISH necə işləyir?
FISH, spesifik genlərin və ya genlərin hissələri (DNT sekansları) aşkar etmək üçün flüoresan probları istifadə edən bir texnikadır. Tibbi mərkəz laboratoriyası və onkoloqlar xərçənginə səbəb olan xəstələri qiymətləndirməkdə yardım etmək üçün FISH-dən istifadə edir və bəzən xərçəng diaqnozu qoyulmuş və müalicə olunan bir xəstəni izləmək üçün istifadə edirlər.
FISH müxtəlif növ nümunələri istifadə edərək şübhələnən yerə və xərçəngin növünə görə edilə bilər: Periferik qandan alınan şiş hüceyrələri , bir kemik iliği biyopsi ya da lenf nodu biopsiyasından və formalin sabit parafin-gömülü toxuma (bu, laboratuvarda işlənmiş və bir növ muma yerləşdirilən bir toxuma nümunəsi, daha sərt, buna görə ince bölmələrə bölünmək və mikroskop altında izləmək üçün monte edilə bilər).
Məktublar nə deməkdir?
FISH-də "H" hibridizmə aiddir.
Molekulyar hibridizmə prosesində etiketli bir DNT və ya RNA sekansı istifadə olunur - qırmızı Lego kərpicini görselleştirin. Prob bir bioloji nümunədə Lego kərpicini və ya DNA sekansını tapmaq üçün istifadə olunur.
Sizin nümunənizdə DNT Lego kərpiclərinin qığılcımlarıdır və bu qatlardakı ən çox kərpiclər qırmızı sondaya uyğun gəlmir.
Və bütün kərpiclər səliqəli 23 cüt kərpic qığılcımlar təşkil olunur - hər bir qazıntı daha çox və ya daha az eşleşmiş homolog xromosomların biridir. Lego tuğlalarından fərqli olaraq, qırmızı Lego proqnozu güclü bir maqnit kimidir və yığınları arasından düzəldilmədən matçını tapır.
"F" flüoresansa aiddir. Bizim qırmızı sızma kərpic yığmalarında itirə bilər, buna görə də rəngli floresan boya ilə işıqlandırılacaq. 23 qoşalaşmış qığılcım arasında uyğunlaşdıqda, bir floresan tag onun yerini göstərir. Beləliklə, tədqiqatçılar və klinisyenlər müəyyən bir fərd üçün müəyyən bir genin (hansı yığın, hansı xromosom) olduğu yerin müəyyənləşdirilməsinə kömək etmək üçün FISH-dən necə istifadə edə biləcəyini görürsünüz.
"I" və "S" in yerində durur. Bu, bizim qırmızı Lego kərpicinizin verdiyiniz nümunə içindəki matçı araşdıracağına aiddir.
Xüsusi qan xərçəngi haqqında nə deməkdir?
FISH və digər in situ hibridizasiya prosedurları müxtəlif xromosom anomaliyaları - genetik maddə dəyişiklikləri, xromosom dəyişiklikləri, aşağıdakılar daxil olmaqla, müəyyənləşdirmək üçün istifadə olunur:
Silinmə - bir xromosom hissəsi getdi
Translokasiya - bir xromosomun bir hissəsi qırılır və başqa bir xromosomun üzərində qalır
Inversiyon - xromosomun bir hissəsi qırılır və geri qayıdır, ancaq tərsinə
Çoğaltma - bir xromosomun bir hissəsi hüceyrə içərisində çox sayda nüsxədə mövcuddur
Hər bir xərçəngin növü öz növbəsində xromosom dəyişiklikləri və müvafiq sondalara malik ola bilər. FISH yalnız xərçəng kimi bir xəstəlik prosesində ilkin genetik dəyişiklikləri müəyyənləşdirməyə kömək edir, həm də terapiya və xəstəliyin remisyonuna cavab izləmək üçün istifadə edilə bilər.
FISH tərəfindən aşkar edilən genetik dəyişikliklər, bəzən eyni növ xərçəngli və oxşar genetik dəyişikliklərə məruz qalan insanlarda keçmişdə müşahidə olunanlara əsaslanaraq, fərdlərin xərçənginin necə davranması ilə bağlı əlavə məlumat verir. Bəzi hallarda FİŞ, diaqnoz qoyulduqdan sonra istifadə edilir, xəstənin nəticəsini ya da ən yaxşı müalicəni proqnozlaşdırmağa kömək edə biləcək əlavə məlumatlar toplamaq üçün.
FISH, kronik lenfositik lösemi (CLL) daxil olmaqla, lösemilərdə xromosomal anomaliyaları müəyyən edə bilər. Kronik lenfositik lösemi / kiçik lenfositik lenfoma üçün FISH, xəstələrə proqnozik kateqoriya axtaracaq: yaxşı, aralıq və ya kasıbdır. Kəskin lenfoblastik lösemiyada (ALL) lösemik hüceyrələrin genetikası sizə xərçəng riskinin səviyyəsi haqqında məlumat verə bilər və terapevtik qərarlar verməyə kömək edir.
FISH paneli də lenfoma, çox miyelom, plazma hüceyrəsi proliferativ xəstəliklər və miyelodisplastik sindrom üçün istifadə edilə bilər. Mantiya hüceyrəsi lenfoma vəziyyətində, məsələn, bu lenfoma ilə tez-tez əlaqəli olan GH / CCND1 t (11; 14) adlı FISHin aşkarlana biləcəyi bir translokasiya var.
Niyə FISH?
FISH'in bir üstünlüyü, fəal olaraq bölünən hüceyrələr üzərində həyata keçirilməməsi deyil. Sitogenetik testlər ümumiyyətlə təxminən üç həftə davam edir, çünki xərçəng hüceyrələri testdən əvvəl təxminən 2 həftə boyunca laboratoriya yeməklərində böyüməlidirlər. Əksinə, FISH nəticələri bir neçə gün ərzində laboratoriyadan əldə edilə bilər.
> Mənbələr:
Xərçəng Cytogenetic Test CPT Kodları.
> Fluorescence In Situ Hibridizasiya (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorescence In Situ Hibridizasiya (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Hematolojik Bozukluklarda Situ Hibridizasyon Testinde Floresansa Yönelik Rehberlik. Molekulyar diaqnostika jurnalı: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.